內容簡介：
TrypLE™ Express酶（1X）不含酚紅是一種非動物源性重組胰蛋白酶替代物，廣泛應用于細胞解離和傳代培養(yǎng)。相較于傳統(tǒng)胰蛋白酶，其成分明確、穩(wěn)定性高，且不含酚紅，避免了光學檢測中的干擾，尤其適用于高靈敏度實驗如流式細胞術和熒光顯微成像。本文綜述了TrypLE™ Express酶（1X）無酚紅的技術原理、性能優(yōu)勢及在干細胞、原代細胞培養(yǎng)中的關鍵應用，并探討了其標準化操作對實驗可重復性的影響。

關鍵詞：
TrypLE™ Express、無酚紅、細胞解離、非動物源性、重組胰蛋白酶

正文：
在生物醫(yī)藥和細胞生物學研究中，細胞解離技術的標準化與安全性日益受到重視。TrypLE™ Express酶（1X）不含酚紅作為一款創(chuàng)新的重組胰蛋白酶替代物，通過基因工程表達的重組蛋白酶（主要為胰蛋白酶類似物）實現(xiàn)高效細胞解離，同時避免了動物源性成分（如豬源胰蛋白酶）帶來的批間差異和病原體風險。

技術優(yōu)勢分析

1. 無酚紅設計：酚紅的去除消除了其在吸光度檢測（如ELISA）或熒光實驗中的背景干擾，尤其適用于CRISPR編輯細胞篩選等高通量檢測。

2. 溫和解離特性：其優(yōu)化的pH緩沖體系（含EDTA）可減少細胞膜損傷，提升原代細胞和干細胞的存活率（文獻報道可達>90%）。

3. 穩(wěn)定性與兼容性：室溫下活性保持穩(wěn)定，且與血清培養(yǎng)基直接中和，簡化了操作流程。

應用場景拓展

• 類器官培養(yǎng)：無酚紅配方避免了對類器官形態(tài)學分析的干擾。

• GMP生產(chǎn)：符合藥用輔料標準（如USP-NF），支持臨床級細胞治療產(chǎn)品的開發(fā)。

行業(yè)趨勢
隨著監(jiān)管機構對動物源性試劑限制的加強（如EMA指南），TrypLE™ Express等合成酶制劑的市場需求將持續(xù)增長。未來，其與微流控芯片或自動化培養(yǎng)系統(tǒng)的整合或成為技術突破點。